كتاب التحضير النسيجي المجهري الأسس النظرية والعملية في التحضير المجهري للعينات النسيجية والخلوية – أحمد عبد العزيز أبو عاقلة PDF

التحضير المجهري للعينات النسيجية والخلوية هو عملية تتضمن عدة خطوات لإعداد العينات للفحص تحت المجهر. هذه الخطوات تضمن الحفاظ على البنية الخلوية والنسيجية للعينات وتحضيرها بشكل يسمح برؤية التفاصيل الدقيقة. إليك الخطوات الأساسية:

1. تثبيت العينة (Fixation)

• الغرض: الحفاظ على بنية العينة ومنع التحلل الخلوي.
• المواد المستخدمة: الفورمالدهيد، الغلوتارالدهيد، الكحول.
• الطريقة: غمر العينة في المثبت لفترة زمنية محددة.

2. الغسل (Washing)

• الغرض: إزالة بقايا المثبت.
• المواد المستخدمة: الماء المقطر، المحاليل الملحية.
• الطريقة: غسل العينة بشكل جيد بعد التثبيت.

3. تجفيف العينة (Dehydration)

• الغرض: إزالة الماء من العينة لتحضيرها للتضمين.
• المواد المستخدمة: سلسلة من المحاليل الكحولية بتركيزات متزايدة (70%، 80%، 90%، 100%).
• الطريقة: غمر العينة في المحاليل الكحولية تدريجياً.

4. التوضيح (Clearing)

• الغرض: إزالة الكحول واستبداله بمادة قابلة للامتزاج مع الوسيط التضميني.
• المواد المستخدمة: الزايلين أو مواد توضيحية أخرى.
• الطريقة: غمر العينة في مادة التوضيح حتى تصبح شفافة.

5. التضمين (Embedding)

• الغرض: إحاطة العينة بمادة صلبة لتحضيرها للقطع.
• المواد المستخدمة: شمع البرافين، راتنجات.
• الطريقة: غمر العينة في مادة التضمين ثم تبريدها لتتصلب.

6. القطع (Sectioning)

• الغرض: تقطيع العينة إلى شرائح رقيقة جداً.
• الأدوات المستخدمة: ميكروتوم (microtome).
• الطريقة: تقطيع العينة إلى شرائح بسماكة تتراوح بين 3-5 ميكرون.

7. تلطيخ العينة (Staining)

• الغرض: تحسين التباين بين مختلف مكونات الخلايا والأنسجة.
• المواد المستخدمة: أصباغ مثل الهيماتوكسيلين وإيوزين (H&E)، صبغات خاصة أخرى.
• الطريقة: غمر الشرائح في الأصباغ وفقاً للبروتوكولات المحددة لكل نوع من الأصباغ.

8. التغطية (Mounting)

• الغرض: حماية الشرائح وتحسين وضوح الصورة المجهرية.
• المواد المستخدمة: مواد تثبيت مثل DPX، غليسيرول.
• الطريقة: وضع شريحة رقيقة من الزجاج (coverslip) على العينة باستخدام مادة التثبيت.

9. الفحص المجهري (Microscopic Examination)

• الغرض: تحليل العينة ومراقبة التفاصيل الخلوية والنسيجية.
• الأدوات المستخدمة: مجهر ضوئي أو إلكتروني.

كل خطوة من هذه الخطوات يجب أن تُنفذ بدقة لضمان جودة العينة المجهرية ودقة النتائج المستخلصة منها.